അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകൾ വീണ്ടും ഉപയോഗിക്കാൻ കഴിയുമോ?ഉത്തരം ഇതാ

ചില സാമ്പിളുകൾ വേർതിരിക്കുക, സൂപ്പർനാറ്റന്റ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ വേർതിരിക്കുക തുടങ്ങിയ ഉയർന്ന ഭ്രമണ വേഗതയും മർദ്ദവും നേരിടാൻ കഴിയുന്ന ലളിതമായ ഒരു ട്യൂബ് ആണ് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബ്.അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിന് ആന്തരിക ട്യൂബിനും പുറം ട്യൂബിനും സമാനമായ രണ്ട് ഭാഗങ്ങളുണ്ട്.ആന്തരിക ട്യൂബ് ഒരു നിശ്ചിത തന്മാത്രാ ഭാരം ഉള്ള ഒരു മെംബ്രൺ ആണ്.ഹൈ-സ്പീഡ് സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷൻ സമയത്ത്, ചെറിയ തന്മാത്രാ ഭാരം ഉള്ളവർ താഴത്തെ ട്യൂബിലേക്ക് (അതായത് പുറം ട്യൂബ്) ചോർന്നുപോകും, ​​കൂടാതെ വലിയ തന്മാത്രാ ഭാരം ഉള്ളവർ മുകളിലെ ട്യൂബിൽ (അതായത് ആന്തരിക ട്യൂബ്) കുടുങ്ങിപ്പോകും.ഇത് അൾട്രാഫിൽട്രേഷന്റെ തത്വമാണ്, ഇത് പലപ്പോഴും സാമ്പിളുകൾ കേന്ദ്രീകരിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകൾ സാധാരണയായി മുൻകരുതലുകളില്ലാതെ ഉപയോഗിക്കാവുന്നതാണ്, എന്നാൽ പ്രോട്ടീൻ സാമ്പിൾ പ്രോസസ്സിംഗിനായി, പ്രത്യേകിച്ച് നേർപ്പിച്ച പ്രോട്ടീൻ ലായനികൾക്ക് (<10ug / ml), അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ മെംബ്രണുകളുമായുള്ള സാന്ദ്രതയുടെ വീണ്ടെടുക്കൽ നിരക്ക് പലപ്പോഴും അളവറ്റതല്ല.PES സാമഗ്രികൾ വ്യക്തമല്ലാത്ത അഡോർപ്ഷൻ കുറയ്ക്കുന്നുണ്ടെങ്കിലും, ചില പ്രോട്ടീനുകൾ, പ്രത്യേകിച്ച് അവ നേർപ്പിക്കുമ്പോൾ, പ്രശ്നങ്ങൾ ഉണ്ടാകാം.നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്ത ബൈൻഡിംഗിന്റെ അളവ് വ്യക്തിഗത പ്രോട്ടീനുകളുടെ ഘടന അനുസരിച്ച് വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു.ചാർജ്ജ് ചെയ്ത അല്ലെങ്കിൽ ഹൈഡ്രോഫോബിക് ഡൊമെയ്‌നുകൾ അടങ്ങിയ പ്രോട്ടീനുകൾ വ്യത്യസ്ത പ്രതലങ്ങളിലേക്ക് മാറ്റാനാകാതെ ബന്ധിപ്പിക്കാൻ സാധ്യതയുണ്ട്.അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിന്റെ ഉപരിതലത്തിൽ പാസിവേഷൻ പ്രീട്രീറ്റ്മെൻറ് മെംബ്രൺ ഉപരിതലത്തിൽ പ്രോട്ടീൻ ആഗിരണം നഷ്ടപ്പെടുന്നത് കുറയ്ക്കും.മിക്ക കേസുകളിലും, നേർപ്പിച്ച പ്രോട്ടീൻ ലായനി കേന്ദ്രീകരിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് നിരയുടെ മുൻകരുതൽ വീണ്ടെടുക്കൽ നിരക്ക് മെച്ചപ്പെടുത്തും, കാരണം ലായനിക്ക് മെംബ്രണിലും ഉപരിതലത്തിലും തുറന്നിരിക്കുന്ന ശൂന്യമായ പ്രോട്ടീൻ അഡോർപ്ഷൻ സൈറ്റുകൾ പൂരിപ്പിക്കാൻ കഴിയും.ഒരു മണിക്കൂറിൽ കൂടുതൽ പാസിവേഷൻ ലായനി ഉപയോഗിച്ച് കോളം മുൻകൂട്ടി മുക്കിവയ്ക്കുക, വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് കോളം നന്നായി കഴുകുക, തുടർന്ന് വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് ഒരു തവണ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്ത് ഫിലിമിൽ അവശേഷിക്കുന്ന പാസിവേഷൻ ലായനി പൂർണ്ണമായും നീക്കം ചെയ്യുക എന്നതാണ് പാസിവേഷൻ രീതി. .നിഷ്ക്രിയത്വത്തിന് ശേഷം ഫിലിം ഉണങ്ങാതിരിക്കാൻ ശ്രദ്ധിക്കുക.നിങ്ങൾക്ക് ഇത് പിന്നീട് ഉപയോഗിക്കണമെങ്കിൽ, ഫിലിം ഈർപ്പമുള്ളതാക്കാൻ നിങ്ങൾ അണുവിമുക്തമായ വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം ചേർക്കേണ്ടതുണ്ട്.

അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകൾ സാധാരണയായി അണുവിമുക്തമാക്കാനും വീണ്ടും ഉപയോഗിക്കാനും കഴിയില്ല.ഒരു ട്യൂബിന്റെ വില കുറഞ്ഞ വിലയില്ലാത്തതിനാൽ, പലരും അത് വീണ്ടും ഉപയോഗിക്കാൻ ശ്രമിക്കുന്നു - മെംബ്രൻ ഉപരിതലം പലതവണ വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് വൃത്തിയാക്കുകയും ഒന്നോ രണ്ടോ തവണ സെന്ട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുകയും ചെയ്യുന്നതാണ് അനുഭവം.റിവേഴ്‌സ് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യാൻ കഴിയുന്ന ചെറിയ ട്യൂബ് വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളത്തിൽ മുക്കി കൂടുതൽ തവണ റിവേഴ്‌സ് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്താൽ നന്നായിരിക്കും.ഒരേ സാമ്പിളിനായി ഇത് ആവർത്തിച്ച് ഉപയോഗിക്കാം, ഉപയോഗിക്കാത്തപ്പോൾ വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളത്തിൽ മുക്കിവയ്ക്കാം, പക്ഷേ ബാക്ടീരിയ മലിനീകരണം തടയും.വ്യത്യസ്ത സാമ്പിളുകൾ മിക്സ് ചെയ്യരുത്.20% ആൽക്കഹോൾ, 1n NaOH (സോഡിയം ഹൈഡ്രോക്സൈഡ്) എന്നിവയിൽ കുതിർക്കുന്നത് ബാക്ടീരിയയുടെ വളർച്ച തടയാനും ഉണങ്ങുന്നത് തടയാനും കഴിയുമെന്ന് ചിലർ പറയുന്നു.അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ മെംബ്രൺ ജലത്തെ ആക്രമിക്കുന്നിടത്തോളം, അത് ഉണങ്ങാൻ അനുവദിക്കില്ല.എന്നിരുന്നാലും, ഇത് മെംബ്രൺ ഘടനയെ നശിപ്പിക്കുമെന്ന് മറ്റുള്ളവർ പറയുന്നു.ഏത് സാഹചര്യത്തിലും, നിർമ്മാതാക്കൾ പൊതുവെ പുനരുപയോഗത്തെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നില്ല.ആവർത്തിച്ചുള്ള ഉപയോഗം ഫിൽട്ടർ മെംബ്രണിന്റെ സുഷിരത്തിന്റെ വലുപ്പത്തെ തടയുകയും ദ്രാവക ചോർച്ചയ്ക്ക് കാരണമാവുകയും ചെയ്യും, ഇത് പരീക്ഷണ ഫലങ്ങളെ ബാധിക്കും.